Hematoksilen & Eozin (Elle Boyama)
Tespit: Genel bir tespit solüsyonu.
Bloklama: Parafin, selloidin veya dondurma mikrotomu (kesitler 5 µm kal›nl›¤›nda).
Boyama Solüsyonunun Haz›rlanmas›;
Harris’in Hematoksilen Solüsyonu:
1.0 gr Kristalize hematoksilen 10.0 ml %95’lik etil alkolde çözülür. 20. 0 gr potasyum alum (KAl(SO4)2.12H2O) veya amonyum alum (NH4Al(SO4)2.12H2O) 200.0
ml dam›t›k suda kaynat›larak eritilir. Her iki solüsyon yavaflça birbirine kar›flt›r›l›r.
Kar›fl›m koyu mor renk al›ncaya kadar (yaklafl›k yar›m dakika) tekrar kaynat›l›r. 0.5
gr merkürik oksit ilave edilir. Kar›fl›m›n bulundu¤u cam kap alt 1/3’ü suda kalacak
flekilde h›zla so¤utulur ve üzerine birkaç damla asetik asit ilave edilebilir. Bu boya solüsyonu bir veya iki aydan fazla kullan›lmamal›d›r.
Alkolik Eozin Solüsyonu:
1.0 gr Eozin Y 1000.0 ml %70’lik alkolde eritilir ve üzerine 5.0 ml glasial asetik asit
ilave edilir.

Boyama ‹fllemi:
1. Ksilol (iki kez en az 2-3 dakika), saf alkol, % 95’lik alkol , %70’lik alkol serilerinden, her biri en az on kez dald›r›l›rak, geçirilir ve parafinden kurtar›l›r.
2. Çeflme suyundan geçirilir.
3. Hematoksilen solüsyonunda 2-5 dakika tutulur.
4. Tekrar çeflme suyundan geçirilir.
5. Gerekiyorsa afl›r› boyanma için asit-alkol solüsyonuna (1000.0 ml % 70’lik
alkole 10 ml yo¤un hidroklorik asit ilavesiyle haz›rlan›r) h›zl›ca birkaç kez
dald›r›l›p ç›kar›l›r. Afl›r› boyanma mikroskopta h›zla kontrol edilir (çekirdek
belirginleflmeli ve zemin parlak veya renksiz olmal›).
6. Akar çeflme suyunda k›saca y›kan›r.
7. Amonyakl› su (1000.0 ml çeflme suyuna 2-3 ml amonyak ilave edilir) veya
doygun lityum karbonat (100.0 ml distile suya 1.0 gr lityum karbonat ilavesiyle haz›rlan›r) solüsyonuna kesitler parlak mavi oluncaya kadar bat›r›l›r.
8. 10-20 dakika akar çeflme suyunda tutulur.
9. 15 saniye ila 2 dakika aras›nda ikinci boya solüsyonu olan eozin solüsyonunda tutulur.
10. % 70’lik alkol, % 95’lik alkol, saf alkol ve ksilolden (her birinden 2’fler kez
ve en az 2 dakika) geçirilerek fleffaflaflt›r›l›r ve kapat›l›r.