Leptospiralar pH değişimlerine çok duyarlıdırlar ve laboratuvarda üretilmeleri çok zordur. U¨retilmeleri için inorganik tuzlar, fosfat tamponu, pepton, serum ve vitamin gibi maddeler içeren özel sıvı ya da yarıkatı besiyerlerine ihtiyaç duyulur. U¨retilmelerinde genellikle sığır serum albumini ve Tween 80 içeren EMJH besiyeri kullanılır. Ayrıca Korthoff, Stuart, Fletcher gibi özel besiyerleri de mevcuttur.