Nemli sıcak hava ile sterilizasyon işleminde otoklav kullanılır. Otoklavda sterilizasyon işlemi için dikkat edilmesi gerek hususlar; Şişeler ve şişe içinde sıvı maddelerin sterilizasyonunda işe kapağı tam kapatılmamalıdır. Malzemeler otoklava yerleştirilmeden önce otoklav bandı yapıştırılmalıdır. Kontamine ve temiz materyaller birlikte steril edilmemelidir. Organik birleşik içeren vasatlar otoklavda steril edilebilmemelidir. Yüksek ısıda denature olduklarından bu yöntem onlar için uygun değildir. Steril edilecek malzemeye uygun sıcaklık ve süre değerleri belirlenmelidir.