Işık mikroskobunun kullanımında yapılması gerekenler şu sıralamada olmalıdır;
Oküler ve objektifler temizlenir.
Mikroskobun ışığı açılıp diyaframı kısılır.
En küçük büyüten objektif ışık yoluna getirilir.
Preparat üst yüzü objektife bakacak şekilde tablaya yerleştirilir ve incelenecek bölüm ışık yolu üzerine getirilir.
Okülerin aralığı incelemeyi yapan kişinin göz aralığına göre ayarlanır.
Işık ve diyafram ayarları yapılır.
Okülerden bakarak görüntü görülünceye kadar makro ayar vidası çevrilir.
• Tekrar ışık ve diyafram ayarları yapılır.
Mikro ayar vidası ile görüntü netleştirilir.
S¸aryo ayar vidaları ile farklı görüntü alanları incelenir.
Daha fazla büyüten bir objekti e inceleme yapılacaksa revolver yardımı ile istenilen objektif ışık yolu üzerine getirilir.
Mikro ayar vidası ile görüntü netleştirilir.
Her büyütmede ışık ve diyafram ayarı tekrar yapılır.
Bu sıralama doğrultusunda  ışık ve diyafram ayarları yapılır ,şıkkı sıralamayı bozmaktadır.