TEMEL VETERİNER PATOLOJİ Dersi İMMUNOHİSTOKİMYASAL VE MOLEKÜLER YÖNTEMLER soru detayı:

PAYLAŞ:

SORU: İmmunohistokimyasal yöntemler nedir? Uygulamaları nasıl gelişmiştir? Açıklayınız.


CEVAP: Hücre ve dokularda yer alan endojen ve/veya ekzojen immunojenik yapıdaki maddelerin, özel yöntemlerle hazırlanmış iflaretli antikorlar aracılığıyla ışık, floresans ve/veya elektron mikroskopta saptanmasına “immunohistokimya” denilmektedir. Bu yöntemlerin ilk uygulamaları 1930’lu yıllarda gerçekleştirilmiş ve antikorla bağlanmada (konjugasyon) azo boyaları kullanılmıştır. Ancak bu boyaların antikorun biyolojik yapısını bozması nedeniyle başarılı sonuçlar elde edilememiştir. Daha sonraki yıllarda ise floresans ışık veren bir madde (florokrom) olan floreseinizothiosiyanat (FITC) ve tetrametilrodamin (TRITC) ile antikor işaretlenmiş ve doku kesitlerinde antijen saptaması gerçekleştirilmiştir. Ancak görünürlüğün değerlendirilmesi için floresans mikroskoba ihtiyaç duyulması, dokuda oluşan boyanmanın uzun süre kalıcı olmaması gibi bazı dezavantajlardan dolayı antikorun farklı maddelerle işaretlenmesi için araştırmalar yapılmış ve sırasıyla peroksidaz ve alkali fosfataz enzimi kullanılmaya başlanmıştır.