CEVAP:

Mikroorganizmalar dahil tüm organizmalardaki nükleoid dizilerinde polimorfizm veya çeşitlilik mevcuttur. RFLP tekniği mutasyonlar nedeni ile restriksiyon endonükleaz enzimleri denen DNA’yı kesen özgün enzimlerin DNA’yı spesifik olarak kestiği yerlerde ortaya çıkan nükleotid bazı değişimlerini ortaya koyma özelliğini taşır. DNA’daki restriksiyon bölgesi 4-12 nükleotid bazlık uzunluktadır. Hedeflenen bakteriyel kromozom bölgesi veya plazmid DNA önceden bilinen veya rastgele seçilen restriksiyon enzimi ile kesilir. İncelenen ve enzimle kesilen DNA bölgesi genellikle kesimden önce bir PCR işlemi ile çoğaltılır. Kesim sonrası oluşan DNA fragmanları elektroforesis ile agaroz veya poliakrilamid jel üzerinde ayrılır. Jelde ayrımdan sonra bandlar etidyum bromid adlı bir boya ile boyanır ve UV ışığı altında incelenir. Ayrılmış DNA parça sayıları, boyutları ve birbirinin üzerine binen bantların olup olmadığı incelenir. Bu bantları naylon membranlar üzerine aktarılabilir ve DNA’lar naylon membran üzerinde spesifik problarla hibridize edilerek saptanabilir.